Голландия тикшерүчеләре эксперименталь тестта CRISPR һәм биолуминценсны берләштерәләрйогышлы авырулар

Нидерланд тикшерүчеләре әйтүенчә, яңа эшләнгән төнге протеин вируслы авырулар диагнозын тизләтергә һәм гадиләштерергә мөмкин.
Аларның тикшеренүләре ACS Publications'да чәршәмбе көнне бастырылган, вируслы нуклеин кислоталарын һәм ялтырап торган ачык зәңгәрсу яки яшел аксымнар кулланып, аларның тышкы кыяфәтен тиз анализлау өчен сизгер, бер адымлы ысул сурәтләнә.
Нуклеин кислотасының бармак эзләрен табып, патогеннарны ачыклау - клиник диагностика, биомедицина тикшеренүләре, азык-төлек һәм экологик куркынычсызлык мониторингында төп стратегия.Күп кулланылган санлы полимераз чылбыр реакциясе (PCR) тестлары бик сизгер, ләкин катлаулы үрнәк әзерләү яки нәтиҗәләрне аңлатуны таләп итә, аларны кайбер сәламәтлек саклау өлкәсендә яки ресурслар чикләнгән шартларда куллану мөмкин түгел.
Нидерландтан килгән бу төркем югары уку йортлары һәм больницалар галимнәре арасындагы тиз, көчле һәм куллану җиңел булган нуклеин кислотасын диагностикалау ысулын эшләү өчен хезмәттәшлек нәтиҗәсе, бу төрле шартларда кулланыла ала.
Алар утлы утлар, утлы ялтыравыклар, су фитопланктонының кечкенә йолдызлары белән рухландырылган, болар барысы да биолуминценций дип аталган күренеш белән эшләнгән.Бу караңгы эффект люцифераз белок катнашындагы химик реакция аркасында килеп чыга.Галимнәр люцифераз белокларын сенсорларга керттеләр, алар максатны тапкач күзәтүне җиңеләйтәләр.Бу бу сенсорларны карау пункты өчен идеаль итсә дә, хәзерге вакытта аларда клиник диагностик тестлар өчен кирәкле югары сизгерлек юк.CRISPR ген редакцияләү ысулы бу мөмкинлекне бирә алса да, катлаулы, шау-шу үрнәкләрендә булырга мөмкин булган зәгыйфь сигналны ачыклау өчен күп адымнар һәм өстәмә махсус җиһазлар кирәк.
Тикшерүчеләр CRISPR белән бәйле протеинны биолуминсент сигнал белән гади санлы камера белән табып була торган ысул таптылар.Анализ өчен РНК яки ДНК үрнәге җитәрлек булуына инану өчен, тикшерүчеләр рекомбиназ полимераз көчәйтү (RPA) эшләделәр, гади техника, 100 ° F тирәсе даими температурада эшли.Алар Luminescent Nucleic Acid Sensor (LUNAS) дип аталган яңа платформа уйлап таптылар, анда ике CRISPR / Cas9 протеины вируслы геномның төрле як өлешләренә хас, аларның һәрберсе өстендә үзенчәлекле люцифераз фрагменты бар.
Тикшерүчеләр тикшергән махсус вируслы геном булганда, ике CRISPR / Cas9 белок максатлы нуклеин кислотасы эзлеклелегенә бәйләнә;алар якынрак булалар, тулы люцифераз протеинын химик субстрат булганда зәңгәр яктылык формалаштырырга һәм чыгарырга мөмкинлек бирәләр..Бу процесста кулланылган субстратны исәпкә алу өчен, тикшерүчеләр яшел ут чыгарган контроль реакция кулландылар.Төсне яшелдән зәңгәргә үзгәртә торган труба уңай нәтиҗә күрсәтә.
Тикшерүчеләр үз платформасын сынап караган RPA-LUNAS анализын эшләп тикшерделәрSARS-CoV-2 RNAзәгыйфь РНК изоляциясеннән башка, һәм аның диагностик күрсәткечләрен назофарингаль сваб үрнәкләрендә күрсәттеләрCOVID-19пациентлар.RPA-LUNAS SARS-CoV-2ны 20 минут эчендә уңышлы тапты, RNA вируслы йөк 200 данә / μL кадәр.
Тикшеренүләр күрсәтүенчә, аларның анализы башка вирусларны җиңел һәм эффектив таба ала."РПА-ЛУНАС инфекцион авыруларны тикшерү өчен җәлеп итә", - дип язган алар.